1、不能,样品不能反复冻融WB(Western Blot,蛋白免疫印迹)是一种常规的蛋白分析技术,常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。
2、抗体工作溶液一般不主张储存反复使用,但是如抗体比较珍贵,可反复使用2-3次。稀释后应在2-3天内使用,4度保存,避免反复冻融。
3、可以,方法有两种:一,目的蛋白分子量已知,根据marker显示的分子量范围切膜之后附不同抗体;二,一种目的蛋白显影过后洗膜,再附其它蛋白的抗体。两种情况下都需要不同的目的蛋白之间分子量有一定的差距,如果分子量接近也有其它办法去除已经附上的抗体,重新附新的蛋白抗体。
4、能,没有问题。 7同一蛋白样品能同时进行两种因子的Western Blot检测吗?当然可以,有的甚至可以同时测几十种样品。 8 蛋白变性后可以存放多久? -80℃,一两年没有问题。最关键两条:不要被蛋白酶水解掉;不要被细菌消化掉(也是被酶水解了)。
5、可以通过有机溶剂多次反复沉淀样品来去除色素,比如丙酮、TCA(三氯乙酸)、甲醇,一次一次地清洗前面研磨成粉的样品,这样可以把叶绿素去掉。 第三步, 离心取沉淀,然后加入裂解液,让蛋白充分地溶解。 第四步: 进行蛋白质的抽提。
6、确保样本操作低温,使用新鲜样品,避免反复冻融。2 若条带不清晰,可加大上样量,调整抗体比例,提高转膜效率。2 若背景过高,可降低抗体比例;在封闭液中加入去垢剂如吐温20;减少上样量;使用其他蛋白作为封闭液,如5%BSA或血清。2 若样品降解,可能是由于转膜不及时导致蛋白扩散。
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1、一般分析是用方差分析、T检验。统计分析是指运用统计方法及与分析对象有关的知识,从定量与定性的结合上进行的研究活动。
2、一般分析是用方差分析、T检验。统计分析是指运用统计方法及与分析对象有关的知识,从定量与定性的结合上进行的研究活动。它是继统计设计、统计调查、统计整理之后的一项十分重要的工作,是在前几个阶段工作的基础上通过分析从而达到对研究对象更为深刻的认识。